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Isabel Otero est une actrice française provenant d'une lignée artistique, étant la fille des peintres Antonio Otero et Clotilde Vautier, ainsi que la sœur de la réalisatrice Mariana Otero. Après avoir perdu sa mère à un jeune âge à cause d'un avortement clandestin, elle suit une formation au Théâtre national de Strasbourg pendant trois ans. Sa carrière décolle en 1985 lorsqu'elle est remarquée au Festival d'Avignon et fait ses débuts au cinéma avec le film Derborence, qui sera sélectionné à Cannes.

Elle se distingue dans des productions indépendantes telles que L’Amant magnifique, où elle partage l'affiche avec Hippolyte Girardot, le père de sa fille Ana Girardot, née en 1988. Par la suite, elle se fait connaître sur le petit écran grâce à des séries comme La Crim’ et Diane, femme flic. Isabel continue de jongler entre le théâtre et les téléfilms, notamment Meurtres en Béarn en 2023. En 2019, elle choisit de s'établir au Costa Rica pour adopter un mode de vie plus durable tout en maintenant des liens étroits avec sa fille et ses petits-enfants.