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Summer Glau a commencé sa carrière artistique après une blessure qui l'a forcée à interrompre sa formation de danseuse. C'est lors d'une visite à des amis à Los Angeles qu'elle signe son premier contrat d'actrice, ce qui l'incite à s'installer définitivement dans la ville. Son premier rôle télévisé est celui d'une danseuse étoile dans un épisode de la série Angel, réalisé par Joss Whedon. Par la suite, elle est choisie pour incarner River Tam dans la série Firefly (2002), et depuis, elle a participé à plusieurs productions telles que Cold Case, CSI, et Les 4400, ainsi qu'au film Sleepover.

Après l'arrêt de Firefly, Summer reprend son rôle emblématique de River Tam dans le film Serenity (2005). Elle joue également Cameron, un cyborg chargé de protéger John Connor dans la série Terminator: The Sarah Connor Chronicles. En outre, elle apparaît dans le film de science-fiction Mammoth, où elle interprète le personnage de Jack. En 2005, les lecteurs du magazine SFX Magazine lui décernent le titre de meilleure actrice pour sa performance dans Serenity.