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Eleonora Laura Prepon, fascinée par l'art de la comédie dès son jeune âge, suit des études en art dramatique à New York. Elle commence sa carrière en tant que mannequin en Europe avant de se tourner vers le cinéma, où elle se fait connaître en 1998 grâce à son interprétation de Donna Pinciotti dans la série télévisée That ’70s Show, qui lui permet de gagner en popularité durant huit saisons.

Après avoir fait des apparitions dans des productions telles que How I Met Your Mother et Castle, elle connaît un nouvel essor avec son rôle d'Alex Vause dans la série Orange Is the New Black, lancée en 2013. En plus de sa carrière d'actrice, elle explore également la réalisation. Épouse de Ben Foster depuis 2018, elle est mère de deux enfants.